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呼吸道感染性病原体的多重核酸检测

儿研所中心实验室 王乐|2020/9/29 11:05:21|

呼吸道感染按照感染位置分为上/下呼吸道感染,引起的病原体包括细菌、病毒、支原体、衣原体、军团菌和真菌等。由于一种病原体可引起多种临床症状,同一临床症状可有多种病原体引起,使得病原体检测面临挑战。另外,90%以上急性呼吸道感染是由病毒引起的,若能及时明确感染病原,可避免抗生素的滥用并促进临床及时开展抗病毒治疗。

现有的检测方法包括病毒培养、免疫性检测和分子生物学检测等方法,各有其优缺点,其中分子生物学技术灵敏度和特异性最好,但传统核酸检测技术只能只对单一病原体,效率较低。多重PCR技术将扩增和检测效率都提高了1个数量级。通过单管内同时加入多达40个引物进行逆转录和基因扩增,随后根据片段长度判断病原体种类。经过核酸抽提、扩增、电泳、判断4个步骤完成检测流程,最终将呼吸道常见的13种病原体清晰明确地表示在软件图谱上。

需要注意的是,核酸检测中,标本质量对于实验结果的影响重大,推荐使用可代表下气道的抽吸痰液送检,若无痰液仅能送检咽拭子,则应注意采集手法。鉴于多重PCR技术的优秀表现,该技术已被写入各类指南及专家共识中,本科室使用该技术不但为临床提供了辅助诊断工具,还积累了部分科研成果分享给读者。

第一,各类病原体具有不同的季节流行趋势,小年龄儿童仍是各类病毒感染的主要受累人群。第二,配对研究表明,肺炎支原体抗体结果与核酸结果存在与年龄相关的不一致现象,年龄越小,不一致率越高。第三,肺炎支原体的合并感染占比高达37%,最易合并的病原体为鼻病毒。

综上,临床常见呼吸道感染病原体以病毒为主,多重核酸检测已获多种专业机构的推荐,可为临床提供快速、准确的病原学诊断依据,并具有科研价值。